cloning, expression and purification of hiv integrase and evaluation of its antigenicity

نویسندگان

زهرا ریخته گران تهرانی

انستیتو پاستور ایران کیهان آزادمنش

انستیتو پاستور ایران احسان مصطفوی

انستیتو پاستور ایران محمد عزیزی

انستیتو پاستور ایران علیرضا خبیری

چکیده

background: improving the performance of hiv diagnosis assays is one of the most important ways to reduce hiv transmission. because of the high mutation rate of hiv, it is critical to use the conserved proteins to develop diagnostic immunoassay methods. because integrase is one of the most conserved proteins of hiv, it may be a good target for this purpose. in this paper cloning, purification and immunogenicity evaluation of integrase are studied. methods: integrase coding sequence was cloned in pet28a expression vector. after transformation of recombinant plasmid to e. coli, protein expression was induced by iptg. immunogenicity of recombinant integrase was evaluated by western blotting. the protein was purified by ni-nta affinity chromatography. results: induction by iptg leads to expression of integrase. the expression level after optimization of conditions was about 40% of total proteins of e. coli. western blotting showed specific immunoreactivity of recombinant integrase to hiv infected sera. the yield of produced protein was 75 mg per one liter of bacterial culture. conclusion: the produced protein retains antigenic properties and can be used in diagnostic immunoassay methods. optimization of culture and protein expression conditions results in recombinant bacteria producing high yields of protein which may be used in industrial purposes.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

Expression and Purification of Neurotoxin-Associated Protein HA-33/A from Clostridium botulinum and Evaluation of Its Antigenicity

Background: Botulinum neurotoxin (BoNT) complexes consist of neurotoxin and neurotoxin-associated proteins. Hemagglutinin-33 (HA-33) is a member of BoNT type A (BoNT/A) complex. Considering the protective role of HA-33 in preservation of BoNT/A in gastrointestinal harsh conditions and also its adjuvant role, recombinant production of this protein is favorable. Thus in this study, HA-33 was expr...

متن کامل

the study of practical and theoretical foundation of credit risk and its coverage

پس از بررسی هر کدام از فاکتورهای نوع صنعت, نوع ضمانت نامه, نرخ بهره , نرخ تورم, ریسک اعتباری کشورها, کارمزد, ریکاوری, gdp, پوشش و وثیقه بر ریسک اعتباری صندوق ضمانت صادرات ایران مشخص گردید که همه فاکتورها به استثنای ریسک اعتباری کشورها و کارمزد بقیه فاکتورها رابطه معناداری با ریسک اعتباری دارند در ضمن نرخ بهره , نرخ تورم, ریکاوری, و نوع صنعت و ریسک کشورها اثر عکس روی ریسک اعتباری داردو پوشش, وثی...

15 صفحه اول

the effect of functional/notional approach on the proficiency level of efl learners and its evaluation through functional test

in fact, this study focused on the following questions: 1. is there any difference between the effect of functional/notional approach and the structural approaches to language teaching on the proficiency test of efl learners? 2. can a rather innovative language test referred to as "functional test" ge devised so so to measure the proficiency test of efl learners, and thus be as much reliable an...

15 صفحه اول

extraction and acetylation of purified trypsin from bovin pancreas and study of some its physico-chemical properties

آنزیم تریپسین در شرایط قلیایی ناپایدار می باشد .و فعالیت پروتئولیتیکی تریپسین منجربه خود هضمی آن در جایگاههای خاصی می گردد. بنابر این آنزیمی با ناپایداری بالا محسوب میگردد. در سالهای اخیر موفق شدند که با ایجاد تغیرات شیمیایی با اضافه کردن فلزات خاص ، کلسیم و یا عمل استیلاسیون منجر به افزایش پایداری آنزیم تریپسین گردند. مطالعات در حال حاضر نشان می دهد که تریپسین استیله شده فعالیت آنزیمی خود را ...

15 صفحه اول

petrology and geochemistry of khar-bash (western shahrood) and its relation ship to iron mineralization

منطقه مورد مطالعه در 23 کیلومتری جنوب غرب شهرستاشاهرود قرار دارد که در نقشه 100000/1 شاهرود قرار گرفته است.ناحیه مورد مطالعه در تقسیمات ساختاری ایران بخشی از زون البرز شرقی است . در طی سنوزوئیک این زون به شدت تحت تأثیر فازهای کوهزایی آلپی قرار گرفته و فعالیت های آتشفشانی انوسن در قسمت های غربی آن دیده می شود . از نظر ترکیب سنگ شناسی منطقه مورد مطالعه متنوع و بیشتر شامل سنگ های رسوبی مانند : آ...

15 صفحه اول

Cloning, Expression, Purification and CD Analysis of Recombinant Human Betatrophin

Betatrophin is a member of the angiopoietin-like (ANGPTL) family that has been implicated in both triglyceride and glucose metabolism. The physiological functions and molecular targets of this protein remain largely unknown; hence, a purified available protein would aid study of the exact role of betatrophin in lipid or glucose metabolism. In this study, we cloned the full-length cDNA of betatr...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله علوم پزشکی رازی

جلد ۲۲، شماره ۱۳۴، صفحات ۵۹-۶۷

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023